使用Assist Plus 移液工作站从血液中轻松分离 gDNA 的自动 DNA 提取方案
系统介绍从血液中轻松分离 gDNA 的自动 DNA 提取方案。
1. 简介 (Introduction)
在分子生物学工作流程中，使用磁珠纯化基因组 DNA (gDNA) 是一种稳健且通用的方法，可从各种生物样本中分离核酸 。从血液中提取 DNA 为肿瘤学、血液学或免疫学等领域的先进基因研究提供了可能 。Clean Blood & Tissue DNA 试剂盒专为高效核酸纯化而设计，并可与全自动 DNA 提取流程兼容 。
本应用说明展示了 INTEGRA 的自动 DNA 提取方案，为从 12 个 EDTA 血液样本中提取 gDNA 提供了一套无需人工干预的解决方案 。该方案依托 VOYAGER 可调枪头间距移液器 在 ASSIST PLUS 移液工作站 上实现多管并行处理，确保液体处理的可靠性 。此外，HEATMAG 模块 促进了自动磁珠处理，并提供温度控制，以提升裂解和洗脱性能 。
核心优势：
• 高效纯化：可从 250 µl EDTA 血液中提取高产量、高纯度的 gDNA 。
• 优化结果：HEATMAG 模块在洗涤过程中自动吸引磁珠，并在裂解和洗脱时精准控温，有助于获得更稳定、更理想的实验结果 。
• 释放人力：ASSIST PLUS 负责液体处理，让实验人员能专注于其他任务 。
• 灵活通量：通过优化的 VIALAB 程序，支持高达 24 个样本的灵活处理 。
• 安全操作：ASSIST PLUS 可放入生物安全柜内，安全处理危险样本 。
| 实验步骤 | 
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2. 实验设置与流程 (Experimental Set-up & Procedure)
实验准备
• 移液器：1,250 µl，6 通道 VOYAGER 。
• 耗材：1,250 µl 无菌滤芯 GRIPTIPS 。
• 平台布局： 
o 位置 A：深孔板 (DWP)，装有裂解液混合物、磁珠溶液、洗涤液和洗脱缓冲液 。
o 位置 B：装有 12 个样本管的 HEATMAG 模块 。
o 位置 C：用于收集洗脱液的 1.5 ml 微量离心管 。
步骤详解
1. 裂解 (Lysis)：在 56 °C 下裂解 EDTA 血液细胞 。VOYAGER 移液器将裂解液转移至血液样本中，并通过交替混匀确保样本完全匀质化 。
2. 结合 (Binding)：磁珠溶液在转移前由 VOYAGER 混匀以确保均匀性，随后 gDNA 结合到磁珠上 。
3. 洗涤 (Washing)：磁珠被洗涤两次。HEATMAG 模块自动移动磁阵列以捕捉磁珠，VOYAGER 移除上清液并加入洗涤液 。洗涤结束后，磁珠会经历 10 分钟的干燥步骤 。
4. 洗脱 (Elution)：在 65 °C 下将 gDNA 从磁珠上洗脱 。VOYAGER 将 120 µl 洗脱缓冲液加入管中，经过混匀和孵育后，将最终产物转移至收集管 。
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3. 实验结果 (Results)
通过对不同供体的血液样本进行测试，验证了该方案的有效性：
• 产量与纯度：该自动流程平均可获得 5.4 µg 的 gDNA 。平均A260/280约为 1.9，A260/230约为 2.0 。
• qPCR 表现：qPCR 分析未显示抑制迹象，不同稀释倍数的输入 DNA 循环阈值 (Ct) 增加保持一致（分别为 3.3 和 3.5），证实了提取产物的高质量和流程的可靠性 。
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4. 结论 (Conclusion)
基于 ASSIST PLUS 移液工作站和 HEATMAG 模块的自动提取方案，为用户提供了高产量、高质量的 gDNA 纯化工作流 。精准的液体处理和磁珠控制确保了结果的重复性，非常适合需要快速处理小批量样本并直接用于后续 qPCR 或 NGS 分析的实验室 。
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注：VIALAB 程序可根据用户的特定移液器和实验室耗材进行快速调整 。