SONY SH800S 流式分选样本制备与纯度控制：从缓冲液到分选模式

分选结果好不好，七分在制备

流式分选的上机时间通常很短，但制备环节决定了纯度上限。SH800S 这类传统流式分选仪靠液滴充电偏转来分选，对样本里的大颗粒、碎屑、气泡非常敏感——堵住喷嘴一次，半天白干。所以样本制备的优先级，远高于纠结分选参数。

缓冲液与滤网

分选缓冲液一般就用 PBS 加 1%–2% 胎牛血清（FBS）或牛血清白蛋白（BSA），目的是减少细胞黏附和喷嘴堵塞。钙离子会影响某些表面标志，含钙镁的缓冲液要谨慎。样本上机前必须过筛：小鼠组织消化后的悬液过 40 µm 滤网，较大的肿块或聚集体过 70 µm，把可能卡喷嘴的团块提前拦掉。

活细胞比例建议先测一道：台盼蓝或 7-AAD 染死细胞，活率低于 70% 的样本分选得率会明显变差，不如先纯化再上机。浓度也要控在合理区间，太稀分选时间拉太长、得率低，太浓又容易堵。我们一般把目标细胞调到 1×10⁷/mL 上下再上机。

分选模式怎么选

SH800S 支持三种典型分选逻辑，区别在纯度和得率的取舍：纯化（Purify）模式只收最纯的那部分，得率最低但干净，适合下游建库或培养；富集（Enrich）模式放宽闸门、优先保数量，适合细胞稀缺、先拿到再说；单细胞（Single cell into plate）模式把细胞逐个打进 96 或 384 孔板，用于克隆或单细胞测序。选哪个，取决于下游实验能不能容忍杂质。

鞘液压力也要匹配细胞大小：大分子（如心肌细胞、胰岛）用低压减少剪切损伤，小细胞（免疫细胞、干细胞）可用较高压力提速度。分选过程中定期用清洗液冲管路，能显著降低交叉污染。

不同样本之间，尤其分选过表达荧光蛋白或带生物安全风险的细胞后，应执行更彻底的冲洗甚至拆洗喷嘴，避免上一管细胞混入下一管。我们一般把高活率、低碎片、浓度稳定的样本排在前面，难处理的样本放最后，减少管路残留的连锁影响。

SH800S 是传统流式分选仪，适合荧光素组合在 12 色以内的常规分选，设置直观、上手快、维护成本可控。一旦研究要做 18 色以上、且多种荧光光谱严重重叠的实验，传统补偿会逼近极限，那时应转向全光谱流式，比如 SONY ID7000 的光谱拆分能力。如果是需要无人值守、自动上样的规模化分选，MA900 自动分选仪 更合适。

需要规划分选实验的样本制备 SOP，或比对不同机型的分选通量与荧光通道数，可以看 SH800S 详情页，也可以在我们的 SONY 流式产品目录 里横向比较。具体方案欢迎 联系我们的应用支持。